Prueba de la coagulasa

Fundamento

Permite diferenciar Staphylococcus aureus (coagulasa positivo) del resto de especies de Staphylococcus (coagulasas negativos). La técnica en tubo detecta coagulasa libre y ligada.

Mecanismo de acción de la coagulasa libre: procoagulasa (enzima extracelular bacteriana) reacciona con un factor activador presente en el plasma sanguíneo similar a la protrombina, dando lugar a un complejo análogo a la trombina (coagulasa propiamente dicha) que reacciona con fibrinógeno formando un coágulo de fibrina en ausencia de Ca2+.
La coagulasa ligada o factor de agregación actúa directamente sobre el fibrinógeno y lo convierte en fibrina. No requiere la presencia de activadores plasmáticos.

Materiales

• Plasma.
• Pipeta Pasteur.
• Tubos de ensayo.
• Muestras en tubo.
• Eppendorf
• Baño maría.
• Gradilla.
• Mechero Bunsen.

Procedimiento

• Se echa 100ul plasma, con la Pipeta Pasteur, en un tubo de hemólisis.

• Se toma un inóculo.
• Se mete el asa de siembra en el tubo con el plasma y se remueve levemente.
• Se llevan los tubos al baño maría y se incuban a 37º durante unos 30 minutos.

• En caso de que se forme un coágulo, será coagulasa positivo y seran Staphylococcus aureus

Resultado

Partíamos con las muestras nº8 y 5 positivos. Nº 12, 13, 21 negativos. Los numeros 8 y 5 seran Staphylococcus aureus.