Fundamento:
Determina el número de células microbianas visibles que desarrollan colonias en el medio de cultivo usado. Cada colonia se forma a partir de una sola célula o de pequeños agregados, por lo que se habla de UFC (unidades formadoras de colonias).
Se realizan diluciones seriadas con un factor común 1·10 o 1·100 de la muestra y se cultiva 1 ml de cada una de ellas. La siembra puede ser en césped o en masa (técnica de Barry), aunque en masa hay muchos microorganismos que no aguatan la temperatura.
Se incuba 24h y se hace el recuento de aquellas placas que tengan entre 30 y 300 colonias.
Materiales- Asa de Siembra
- Tubo de ensayo
- Mechero Bunsen
- Medio de cultivo en placa petri solido esteril, medio de cultivo liquido en tubo
- Asa de Digralsky
- Gradilla
- Micropipeta
- Vaso de precipitado con Alcohol
Procedimiento
Siembra previa al vertido del medio en la placa. Para ello:
- En un medio de cultivo fundido (unos 15ml de medio) en tubo,se adiciona la cantidad del inoculo y se homogeiniza la muestra agitandolo. 1 ml de caldo nutritivo y 9 ml de Suero, dilucion 1/10 1/100 1/1000
- Una vez, constituida la muestra, se vierte en una placa petri esteril con una micropipeta 1ml del medio liquido con el inoculo que se encuentra en el tubo.
- Se homogeiniza el medio con el inoculo con un asa de Digrasky en alcohol. Previamente esterilizada en el mechero bunsen
- Una vez bien extendida la muestra, la dejamos secar y le damos la vuelta.
- Para ver las colonias en medio sólido, cogeremos un inóculo de cada una de las muestras (con las condiciones de esterilidad y seguridad ya dichas) y las sembraremos en placa mediante la siembra por agotamiento en estría múltiple.
- Estas también las dejaremos en reposo durante 24 horas, para poder hacer posible el recuento de las colonias en placa.
Resultados
Lo ideal hubiera sido un recuento de placas en las que hubieran entre 30-300 colonias, no ha sido posible ya que no han crecido las suficientes como para hacer el recuento
-Se tendrian que haber contado la mitad de una placa petri y haberlas multiplicado x2
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