Preparación de Medios de Cultivo
Fundamento
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
Los medios de cultivo son el soporte nutricional para que las bacterias cumplan su ciclo vital, se reproduzcan y aumente su población.
- Medios líquidos: Se les llaman caldos. Se presentan en tubos de ensayo y en el caso de crecimiento bacteriano se puede apreciar de las siguientes maneras:
Preparacion de medio de cultivo liquido en tubo
Materiales
-Frasco ISO
-Mechero Bunsen
-Gradilla
-Tubos de ensayo
-Microondas
-Guantes Termicos
-Balanza Analítica
Reactivos
Agar nutritivo (Para Caldo de Cultivo)
Agua destilada
Calculos
Lo mas sencillo para calcular la medida necesaria
de Agar nutritivo que debemos usar es realizar una
regla de 3
Procedimiento
1º Preparamos el material en la zona de trabajo.Medimos el volumen de agua que necesitamos para realizar el medio de cultivo liquido, 350ml para 35 tubos de 5 ml cada uno.
Para ello utilizaremos una probeta, y vertiremos la cantidad de
agua destilada necesaria. Después pesaremos la cantidad de caldo nutritivo
en la balanza, 8 gramos (siempre procuraremos
echar un poco mas de la cantidad necesaria por
si tenemos perdidas.
2º Colocaremos en el frasco Iso una base de agua de esos 350ml necesarios, que sirva de colchon para que a la hora de echar el medio solido, es recomendable que el agua ya este caliente paraque se diluya mejor y agitar bien para que no queden grumos. Llevar al microondas controlando que no llega a ebullición completamente.
Autoclavamos para esterilizar:
Para ello utilizaremos una probeta, y vertiremos la cantidad de
agua destilada necesaria. Después pesaremos la cantidad de caldo nutritivo
en la balanza, 8 gramos (siempre procuraremos
echar un poco mas de la cantidad necesaria por
si tenemos perdidas.
2º Colocaremos en el frasco Iso una base de agua de esos 350ml necesarios, que sirva de colchon para que a la hora de echar el medio solido, es recomendable que el agua ya este caliente paraque se diluya mejor y agitar bien para que no queden grumos. Llevar al microondas controlando que no llega a ebullición completamente.
Autoclavamos para esterilizar:
3º Por ultimo con una pipeta, extraer 10ml
de caldo de cultivo y vertirlo en tubos de ensayo, y le ponemos una gasa y tapón,
para que no entren partículas que puedan interferir.
Preparación de medio de cultivo solido en Placa Petri
Calculos
1- Preparamos el material que necesitamos en un orden lógico donde podamos manejarnos correctamente.
2- Con mucho cuidado comenzamos a rellenar las placas con el mechero bunsen encendido y lentamente sin hablar, para no contaminar la placa.
Necesitaremos alrededor de 15 ml por placa, tenemos que rellenar casi la mitad de la placa con el agar nutritivo.
Esperaremos a que el agar solidifique pasado un tiempo.
Cuando todas las placas estén solidas llevaremos las placas al autoclave para su esterilización.
Cuando la esterilización termine en el autoclave, rotulamos las placas con la identificación necesaria para evitar errores y equivocaciones.
Resultado:
Placas Petri listas para su cultivo
Preparación de medio de cultivo solido en tubo inclinado
de caldo de cultivo y vertirlo en tubos de ensayo, y le ponemos una gasa y tapón,
para que no entren partículas que puedan interferir.
Preparación de medio de cultivo solido en Placa Petri
La preparación de un medio solido en placa tiene el mismo proceso que el medio de cultivo liquido. Se necesita:
Material
-Frasco ISO
-Mechero Bunsen
-Gradilla
-Placa petri
-Microondas
-Guantes Termicos
-Balanza Analitica
Reactivos
-Agua destilada
-Agar Nutritivo
Reactivos
-Agua destilada
-Agar Nutritivo
Calculos
Pesamos la cantidad de agar que necesitamos para prepararlo según su relación indicada en el bote
Lo mas sencillo para calcular la medida necesaria
de Agar nutritivo que debemos usar es realizar una
regla de 3
En el Bote del producto aparecen los gramos necesarios
para 1 Litro, que son 23g.
350ml x 23g / 1000ml = 8.05g
10ml en cada tubo
Procedimiento
- El procedimiento a seguir es muy similar al anterior, pesamos la cantidad necesaria de Agar nutritivo, medimos la cantidad de agua necesaria en una probeta, y lo mezclamos en un frasco ISO donde se calentara en el microondas hasta casi su ebullición.
2- Con mucho cuidado comenzamos a rellenar las placas con el mechero bunsen encendido y lentamente sin hablar, para no contaminar la placa.
Necesitaremos alrededor de 15 ml por placa, tenemos que rellenar casi la mitad de la placa con el agar nutritivo.
Esperaremos a que el agar solidifique pasado un tiempo.
Cuando todas las placas estén solidas llevaremos las placas al autoclave para su esterilización.
Cuando la esterilización termine en el autoclave, rotulamos las placas con la identificación necesaria para evitar errores y equivocaciones.
Resultado:
Placas Petri listas para su cultivo
Preparación de medio de cultivo solido en tubo inclinado
Material
-Frasco ISO
-Mechero Bunsen
-Gradilla
-Tubo de ensayo
-Microondas
-Guantes Termicos
-Balanza Analitica
Reactivos
-Agua destilada
-Agar Nutritivo
Calculos
Pesamos la cantidad de agar que necesitamos para prepararlo según su relación indicada en el bote
2- Comenzamos a vertir el agar nutritivo en los tubos de ensayo con cuidado y los volcamos hasta que solidifiquen y se queden asi:
Rotulamos y ya están listos para sembrar.
Reactivos
-Agua destilada
-Agar Nutritivo
Calculos
Pesamos la cantidad de agar que necesitamos para prepararlo según su relación indicada en el bote
Lo mas sencillo para calcular la medida necesaria
de Agar nutritivo que debemos usar es realizar una
regla de 3
En el Bote del producto aparecen los gramos necesarios
para 1 Litro, que son 23g.
350ml x 23g / 1000ml = 8.05g
5 ml en cada tubo
Procedimiento
1- Preparamos el material que necesitamos en un orden lógico donde podamos manejarnos correctamente.
Procedimiento
- El procedimiento a seguir es muy similar al anterior, pesamos la cantidad necesaria de Agar nutritivo, medimos la cantidad de agua necesaria en una probeta, y lo mezclamos en un frasco ISO donde se calentara en el microondas hasta casi su ebullición.
2- Comenzamos a vertir el agar nutritivo en los tubos de ensayo con cuidado y los volcamos hasta que solidifiquen y se queden asi:
Rotulamos y ya están listos para sembrar.
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